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點(diǎn)擊次數(shù):13397 發(fā)布時(shí)間:2012/11/8 8:57:55
豚鼠的取血法及血清和血漿的制備方法
一、豚鼠的取血法
(1)足背中靜脈取血:助手固定動(dòng)物,將其后肢膝關(guān)節(jié)伸直捉到實(shí)驗(yàn)者面前,實(shí)驗(yàn)者將動(dòng)物腳背面用酒精消毒,找出背中足靜脈后,以左手的拇指和食指拉住豚鼠的趾端,右手拿注射器針刺入靜脈。拔針后立即出血,呈半球狀的隆起。采血后,用紗布或脫脂棉壓迫止血。反復(fù)取血時(shí),兩后肢交替使用。
(2)心臟取血:豚鼠的心臟取血法與兔的采血方法相似。
二、血清和血漿的制備方法
血清和血漿均是不含細(xì)胞(包括血小板)等有形成分的血液液體部分,其主要區(qū)別是血清不含凝血因子和血小板,血漿則含有凝血因子,它們的制備方法如下:
(1)血清的制備:獲得的血液不能抗凝,盛于離心管或可以離心的器皿中,靜置或置37℃環(huán)境中促其凝固,待血液凝固后,將其平衡后離心(一般為3000rpm,離心 5~10min),得到的上清液即為血清,可小心將上清吸出(注意切勿吸出細(xì)胞成分),分裝備用。
(2)血漿制備:在盛血的容器中先加人一定比例的抗凝劑(抗凝劑:血液 = 1:9,將血液加到一定量后顛倒混勻,離心(離心條件同上)后所得的上清液即為血漿。初用者將上清移至另一清潔容器,吸出血漿時(shí)用毛細(xì)吸管貼著液面逐漸往下吸,切忌不能吸起細(xì)胞成分。
(3)富含血小板血漿制備:將獲得的血液經(jīng)800rpm,離心5min,其上清即為富含血小板血漿。
常用血液抗凝劑
劑名 | 抗凝力 | 機(jī)理 | 應(yīng)用 | 禁忌 |
10%草酸鉀 | 0.2ml抗凝10ml 的血 | 與Ca2+結(jié)合成不溶性草酸鈣而抗凝血 | 非蛋白氮二氧化碳結(jié)合力 | 血K+ 血Ca2+ |
草酸鈉 | 1~2mg抗凝1ml的血 | 與Ca2+結(jié)合成不溶性草酸鈣而抗凝血 | 凝血酶原時(shí)間及復(fù)鈣時(shí)間測(cè)定 | 血K+ Ca2+ |
3.8%枸櫞酸鈉 | 6mg抗凝1 ml的血 | 與血中生成不溶性離子化的枸櫞酸鈣,阻止血液凝固 | 輸血、凝血象1:9血沉1:4 | |
雙草酸鹽(草酸鉀、草酸胺) | 0.5ml抗凝5ml的血 | 保持紅細(xì)胞形態(tài)不變 | RBC壓積測(cè)定 | |
草酸鉀3g、氟化鈉1g混合劑 | 4mg抗凝1ml的血 | 抑制葡萄糖分解而保持血糖濃度 | 血糖測(cè)定 | BUN (尿素氮) |
肝素 | 0.1ml抗凝5~10ml的血;15±2.5IU(干粉)抗凝1ml血 | 抑制凝血酶原轉(zhuǎn)為凝血酶 | 血氨 血?dú)夥治?/span> | 3P試驗(yàn) |
EDTA-K2 | 1.5~2.2mg(干粉)抗凝1ml血 | 與Ca2+結(jié)合成不易電離的可溶性絡(luò)合物 | 血細(xì)胞計(jì)數(shù) | 凝血象,血小板功能 |
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