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豚鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中的幾個(gè)問題解惑

點(diǎn)擊次數(shù)：13037 發(fā)布時(shí)間：2014/6/10 10:30:12

今天開始，本月就已經(jīng)過去三分了，我公司的主推產(chǎn)品豚鼠elisa試劑盒也已經(jīng)正式上市，今天上海恒遠(yuǎn)與您一起來看實(shí)驗(yàn)中的幾個(gè)問題解說。

一臨界值質(zhì)控血清

分定值和未定值兩種。如只用一份質(zhì)控血清定值，一般定在正常值與異常值交界點(diǎn)上，定性測(cè)定時(shí)處于弱陽性水平，稱為臨界值。乙肝標(biāo)志物臨界值的制定，應(yīng)按臨床要求，為臨床提供統(tǒng)一的判斷弱陽性的標(biāo)準(zhǔn)。

臨界值質(zhì)控血清可以作為試劑盒中的陽性對(duì)照品和陰性對(duì)照品以外的第三個(gè)對(duì)照品，它可以靈敏地反映出試劑盒的檢出水平，確保弱陽性反應(yīng)的標(biāo)本不漏檢。

二質(zhì)控血清的制備

每個(gè)實(shí)驗(yàn)室可以根據(jù)自己的條件，選用臨床中心提供的質(zhì)控血清，或按以下方法自己制備本室使用的質(zhì)控血清。

1 收集新鮮的無溶血、無黃疸、無細(xì)菌污染的陽性血清。

2 56℃加熱10小時(shí)來活。

3 離心或過濾除去沉淀。

4 用10%的小牛血清或正常人血清（PBS緩沖液）將收集的血清稀釋至所需的濃度。如能用正常的人血清稀釋更好，因其成份更接近于檢測(cè)標(biāo)本。

5 抽濾除菌。按一次使用的量分裝小安瓿，封口，20℃保存?zhèn)溆�。不可反�?fù)凍融。

被檢物要求檢出的水平常被認(rèn)為是質(zhì)控血清應(yīng)選擇的水平。如果該試驗(yàn)還有其它要求，則應(yīng)加所要求濃度的質(zhì)控物。

6 標(biāo)定含量。20-30次測(cè)定結(jié)果刪除>±2SD數(shù)據(jù)的均值作為靶值，并與已知定值血清對(duì)比測(cè)定。

三質(zhì)控血清的使用

衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心制備的乙肝標(biāo)志物質(zhì)控血清，可以在-20℃保持半年定值不變。冰凍狀態(tài)融化使用時(shí)，應(yīng)先混勻，未用完部分可在4℃保存5天。不宜反復(fù)冰融或自行分裝。開展某項(xiàng)檢驗(yàn)的室內(nèi)質(zhì)控工作需要的質(zhì)控血清，一般按3-6個(gè)月用量準(zhǔn)備。自制的不定值質(zhì)控血清，在一批質(zhì)控血清將用完之前，需準(zhǔn)備下一批質(zhì)控血清。質(zhì)控血清要求性能穩(wěn)定，較長(zhǎng)期內(nèi)效價(jià)不變，其理化性質(zhì)應(yīng)與病人樣本相近，這樣才能有效地起到監(jiān)測(cè)作用。

原創(chuàng)作者：上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司