分析一：實(shí)驗(yàn)室二抗主要的應(yīng)用

    可以應(yīng)用到幾乎所有類型的免疫檢測中，尤其是Western blot、免疫組織化學(xué)和免疫細(xì)胞化學(xué)。

    事實(shí)上，二抗在ELISA及流式細(xì)胞術(shù)中應(yīng)用也很廣泛，不僅用于科學(xué)研究，而且廣泛的應(yīng)用于臨床分析和疾病診斷。比較而言，二抗在免疫沉淀中的應(yīng)用相對較少。以下內(nèi)容是基于對所收集的二抗信息進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析后得出的一些結(jié)論，對于您在具體的實(shí)驗(yàn)中如何選擇*適合的抗體具有借鑒作用。

分析二：如何正確的選擇二抗

     ① 考慮因素：有一抗的物種、產(chǎn)生二抗的宿主、一抗的類別或亞類、二抗所耦聯(lián)的探針類型及二抗的形式等等。因此選擇哪種類型的二抗很大程度上決定于您所使用的一抗是什么，尤其針對種屬和類別而言。

     ② 與一抗的聯(lián)系：通常情況下，一抗可以在山羊、小鼠、兔子、大鼠及綿羊體內(nèi)制備，其中屬小鼠及兔子*為常見，相應(yīng)的，二抗的種屬也應(yīng)當(dāng)與一抗的相一致。而對于制備二抗的宿主，則應(yīng)選擇另外一種不同的動物，一般選用驢、山羊、兔子、綿羊或其他較大的動物，可以實(shí)現(xiàn)二抗的大規(guī)模制備，其中又屬山羊使用*多。

     ③ 二抗類別或亞類的選擇：應(yīng)遵循與一抗類別或亞類相一致的原則，其中抗IgG使用*多。這可能是因?yàn)槌�了五種類別的單克隆抗體外，很多一抗是多克隆抗體，屬于IgG類免疫球蛋白。此外anti-IgG可以識別幾乎所有類型的IgG亞類，因此，在不清楚一抗是屬于那個(gè)類別或亞類的時(shí)候，anti-IgG抗體是個(gè)不錯(cuò)的選擇。

    此外，整個(gè)IgG分子是*常用的一種二抗分子形式，而F (ab’) 2片段或Fab片段一般僅用于特殊實(shí)驗(yàn)中，如需要避免抗體與具有Fc受體的細(xì)胞結(jié)合的情況，或需要封閉內(nèi)源性免疫球蛋白的時(shí)候。

    由于ELISA二抗所具備的優(yōu)點(diǎn)使得其在免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)中得以應(yīng)用廣泛。對于二抗所耦聯(lián)的探針的選擇，主要取決于具體的實(shí)驗(yàn)。對于Western blot，*常用的探針是HRP。

原創(chuàng)作者：上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司