生物大分子的貯藏保存可分為干態(tài)和液態(tài)貯藏兩種。所以蛋白保存也有干態(tài)保存和液態(tài)保存兩種。但是蛋白保存條件卻受諸多因素的影響。下面就為大家分析一下影響蛋白保存條件的因素。
蛋白質(zhì)失活受多種理化因素的影響，主要有空氣、溫度、水分、光線、酸堿度、樣品狀態(tài)、微生物活動(dòng)、保存時(shí)間和容器等；這些因素可單獨(dú)起作用，但更多情況是協(xié)同作用；以下就對(duì)蛋白保存條件受到的影響進(jìn)行簡(jiǎn)要分析
1. 空氣
空氣的影響主要與潮解、微生物污染及自動(dòng)氧化等有關(guān)。空氣中的微生物污染可導(dǎo)致樣品腐敗變質(zhì)，吸濕后的樣品除潮解變性外也會(huì)造成微生物活動(dòng)的有利環(huán)境。某些具有較強(qiáng)還原性的樣品，露置于空氣中不久便氧化變質(zhì)，如巰基酶的失活等。某些樣品（特別是液體樣品或半成品）在空氣中的氧化是—種自動(dòng)氧化過(guò)程，是由空氣中的氧自發(fā)引起的游離基鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。自動(dòng)氧化的機(jī)理很復(fù)雜:包括氧化、還原、聚合、水解等;氧濃度、水、pH、溫度、紫外線等對(duì)自動(dòng)氧化均有影響。
2. 溫度
每種樣品均有其穩(wěn)定的溫度范圍，溫度升高會(huì)引起許多物理和化學(xué)變化，如溫度升高l0℃，氧化反應(yīng)約加快數(shù)倍，酶促反應(yīng)約增加1-3倍；又如50℃以上蛋白質(zhì)容易變性，不利于物質(zhì)的穩(wěn)定存在。另外，適宜的溫度(如室溫)又是微生物污染的重要條件。而低溫卻可以抑制氧化、水解等化學(xué)反應(yīng)及微生物生長(zhǎng)，使微生物處于生命遲緩和隱蔽狀態(tài)。故大多數(shù)生化樣品選擇低溫保存，其穩(wěn)定性可大大增加。
3．水分
水分也是影響樣品質(zhì)量的主要因素。這里所指的水分，可能來(lái)自樣品本身，也可能是樣品吸濕的結(jié)果。水分除直接參與水解、酶解、水合和加成等反應(yīng)外，還能加速氧化、聚合、離解和霉變。蛋白質(zhì)和酶等大分子含水量太高時(shí)，會(huì)導(dǎo)致結(jié)構(gòu)松散，穩(wěn)定性下降而易于失活。為避開(kāi)或削弱水的影響，保存固態(tài)樣品要密閉，液態(tài)樣品須凍結(jié)或加穩(wěn)定劑。
4．光線
某些分子可吸收某一波長(zhǎng)的光，反射或透過(guò)其它光波的光。樣品吸光后，使分子活化，內(nèi)能增加，不利于樣品保存。在不同條件下，樣品對(duì)光的敏感性各不相同，受光作用發(fā)生變化的程度也不同。
5．酸堿度
酸堿度對(duì)液態(tài)樣品的保存影響較大,不同樣品的穩(wěn)定pH不同，可由實(shí)驗(yàn)求得或從文獻(xiàn)資料查得。液體樣品保存時(shí)，常用緩沖劑控制pH，選擇緩沖劑不僅要考慮緩沖容量的大小，還要注意緩沖劑的種類和濃度對(duì)樣品穩(wěn)定性的影響。如青霉素用檸檬酸鹽而不用磷酸鹽和醋酸鹽作緩沖劑，因者的催化其水解的速度小得多。
6．時(shí)間
不同樣品均有其不同的有效期限，因此保存的樣品需要作定期檢查、處理或更換。
原創(chuàng)作者：上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司
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